原代細胞的培養應用及分離注意事項

　　原代細胞培養的應用：
 

　　1、為研究生物體細胞的生長(cháng)、代謝、繁殖提供有力的手段；
 

　　2、為傳代培養創(chuàng )造條件；
 

　　3、服務(wù)于臨床實(shí)踐，用于藥物篩選等。
 

　　原代細胞培養之分離注意事項：
 

　　組織塊培養法：
 

　　1)組織塊接種后的前3天，在觀(guān)察和移動(dòng)的過(guò)程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng)，否則組織塊不易附著(zhù)于瓶壁上或附著(zhù)后也會(huì )脫落飄起。
 

　　2)加入的培養液不宜過(guò)多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來(lái)。
 

　　3)當細胞向外遷徙出來(lái)后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì )影響原代細胞的生長(cháng)。
 

　　4)為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。
 

　　原代細胞與細胞系有什么區別？
 

　　根據傳統定義，自組織第一次收獲和接種的細胞被稱(chēng)為原代細胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類(lèi)細胞直接從組織分離，生命周期有限，經(jīng)數次傳代后會(huì )逐漸停止生長(cháng)。原代細胞在有限的生命周期內需掌握好細胞的最大生長(cháng)空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
 

　　細胞系是不斷生長(cháng)、分化的細胞群，因其經(jīng)過(guò)遺傳改造，致使其具有無(wú)限增長(cháng)的潛能。體外生長(cháng)的細胞系用于醫療或科研。
 

　　但實(shí)際上，經(jīng)過(guò)長(cháng)時(shí)間、連續的傳代培養后，細胞系隨著(zhù)代數的增加，細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
 

　　需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì )有所不同。許多研究員不用細胞系這個(gè)詞表示細胞群，除非細胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。