bv2細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種
更新時(shí)間:2021-12-28瀏覽:599次
bv2細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種,是中樞神經(jīng)系統中的一道也是主要的一道免疫防線(xiàn)。中風(fēng)引起的腦損傷會(huì )激活小膠質(zhì)細胞,使小膠質(zhì)細胞極化為M1型和M2型。M1小膠質(zhì)細胞可以產(chǎn)生高水平的促炎細胞因子,加劇急性腦損傷,而M2型表現出對大腦具有神經(jīng)保護作用,改善中風(fēng)后的癥狀。然而,M2小膠質(zhì)細胞介導神經(jīng)保護的潛在機制仍不清楚。有文獻表明,間充質(zhì)干細胞來(lái)源的外泌體有利于缺血性卒中后神經(jīng)元的重塑和功能恢復,還有小膠質(zhì)細胞來(lái)源的微囊泡有調節神經(jīng)元興奮性的報道等。
bv2細胞復蘇實(shí)驗步驟:
1.從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分鐘左右)。
2.培養基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。
3.1低速離心10分鐘,吸去上清,加入新鮮的培養基培養剛復蘇的細胞。
3.2六個(gè)小時(shí)細胞*貼壁后吸去含有凍存液的培養基并換成*培養基。
bv2細胞傳代實(shí)驗步驟:
1.取密度80%左右的Hela細胞,吸去舊的培養基,用PBS或者Trypsin消化液潤洗細胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。
2.吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分鐘,于倒置顯微鏡下觀(guān)察,當細胞之間出現間時(shí)或者變圓時(shí),吸掉Trypsin 消化液。(也可以直接加入適量含血清的新鮮培養基終止Trypsin的消化作用并進(jìn)行吹打分離細胞,消化細胞時(shí)應靜置以避免漂浮的細胞滾動(dòng)成團)
3.加入適量新鮮培養基,用移液器上下吹打數次打散細胞團塊以盡可能形成單細胞懸液,吹打均勻后,按照稀釋比例轉移至新的培養瓶中,補充*培養基并以正常培養條件培養。