隨著(zhù)實(shí)驗室細胞培養的發(fā)展,除了原代培養之外,還將建立開(kāi)發(fā)或獲得眾多的細胞系。每一個(gè)細胞系均擴大了其起源細胞的應用,成為有價(jià)值的資源。若該細胞系頗為*,則其可能是不可替換的;替換至少也是昂貴與耗時(shí)的。因此,必須通過(guò)保存細胞系來(lái)保證這種重要投資。
由于培養早期傳代培養的選擇,有限細胞系的衰老以及連續細胞系的遺傳和表現不穩定性,使細胞系在連續培養時(shí)有變異傾向。
此外,即使在管理好的實(shí)驗室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發(fā)生率也很高。因此,存在諸多理由進(jìn)行冷凍儲存細胞,總體概述有幾大不得不凍存細胞的理由:
①由于遺傳不穩定性而導致基因漂移;
②衰老,最后導致細胞系消失;
③生長(cháng)特性的轉化以及惡性相關(guān)特性的獲得;
④由于選擇和去分化導致表型的不穩定性;
⑤微生物污染;
⑥其他細胞系的交叉污染;
⑦由于操作粗心而導致的錯誤鑒別;
⑧孵育箱故障;
⑨對于保存那些不立即使用的細胞系,可節省時(shí)間和材料;
⑩需要將細胞系轉給其他使用者。
在考慮凍存細胞之前,需滿(mǎn)足以下特定條件:
01
確認凍存前需證實(shí)細胞系未受污染,且確為該細胞系。盡管對于新獲得的細胞系,可以在*確認前凍存幾支,但在大量?jì)龃媲皯M(jìn)行*確認。
凍存時(shí)間,如果是有限細胞系,這些細胞應經(jīng)5代倍增生長(cháng),獲得足夠量的細胞再進(jìn)行凍存。連續細胞系應將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長(cháng)至足夠數量再進(jìn)行凍存。連續細胞系有其優(yōu)勢:它們可無(wú)限生長(cháng),生長(cháng)比較迅速,容易克隆,但是它們缺乏遺傳穩定性。有限細胞系通?;蚪咏扼w。在一定傳代水平間是穩定的,但是,它們很難克隆,生長(cháng)緩慢,最終死亡或發(fā)生轉化。
02
推薦產(chǎn)品
【SNL-018】人胚肺細胞
【SNS-002】特級胎牛血清
【SNM-002D】DMEM高糖(含丙酮酸鈉、谷氨酰胺,含雙抗)
公司介紹
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區光谷生物城,專(zhuān)注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù),公司建有標準化GMP實(shí)驗室、動(dòng)物房,已整體通過(guò)ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認證,獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽(yù)。
公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎培養基、*培養基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細胞及培養配套產(chǎn)品一站式采購;細胞庫凍存細胞系500余種,同時(shí)通過(guò)不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類(lèi);公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。
END
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