動(dòng)物細胞培養4大常用合成培養基

體外培養動(dòng)物細胞已經(jīng)有近百年的歷史，但該技術(shù)真正得以廣泛應用及各種類(lèi)型組織細胞大量體外培養成功是由于適合細胞體外生長(cháng)需要的合成培養基的問(wèn)世。合成培養基是對細胞體內生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下的模擬。這種模擬不是被動(dòng)的、不加選擇的，而是在體外反復實(shí)驗和篩選，進(jìn)行強化和重新組合后形成的人工合成培養基。

合成培養基種類(lèi)很多，據報道已有數十種，每種合成培養基最初都是為培養某種細胞而設計的，但應用后發(fā)現其他細胞也可以生長(cháng)或經(jīng)改良也適合其他細胞的生長(cháng)。

01199培養基

199培養基是Morgan、Morton及Parker等人在1950年為培養雞胚細胞研制的。最初是在Earle生理鹽水溶液的基礎上添加各種物質(zhì)如氨基酸。維生素，然后又補加嘌呤、喀啶、膽固醇、ATP等進(jìn)行試驗性研究，并根據哺乳動(dòng)物細胞的特點(diǎn)進(jìn)一步完善其配方。

199培養基含有69種成分。其組成成分雖然很多，但單獨使用時(shí)只能維持細胞存活數天，在加入血清后可以維持很多種細胞的生長(cháng)。由干成分較為復雜，現在一般應用不多。后在199基礎上改良研制了109合成培養基，與199相比較效果較好。

02Eagle's培養液

Parker等根據氨基酸和維生素等物質(zhì)的生理含量制備出一種基本培養液，后來(lái)Eagle等對來(lái)源于人的細胞株進(jìn)行更深入的研究后發(fā)現胞質(zhì)內的氨基酸及維生素的含量比基本培養液中大1~5倍而且其中谷氨酰胺等13種氨基酸和8種維生素是必需的，于是將這些物質(zhì)的濃度調整至接近胞質(zhì)內含量的水平，制成了較低限度培養液(Eagle's minimum essential medium,MEM)，MEM是常用的培養液。

后來(lái)研究人員在MEM基礎上又改良研究制成了BME (Basal Eagle medium)和 DMEM(Dulbecco MEM)兩種培養液。BME去除了MEM成分中的一部分必需氨基酸，增添了一些非必需氨基酸。DMEM是在MEM基礎上增加了各成分的用量，又可分為高糖型及低糖型。高糖型含葡萄糖4500 mg/L，低糖型含量為1000mg/L。高糖型適用于生長(cháng)較快，附著(zhù)性差的腫瘤細胞，例如雜交瘤中骨髓瘤細胞，DNA轉染的轉化細胞等的培養。

03RPMI 1640培養液

RPMI 1640是由Moor等研究成功的，最初為培養小鼠白血病細胞的需要而制備。開(kāi)始的配方特別適合懸浮細胞的生長(cháng)，主要針對淋巴細胞，后經(jīng)幾次改良從 RPMI 1630、1634，至RPMI 1640。其組成較為簡(jiǎn)單，但可以適應很多種類(lèi)細胞的生長(cháng)。不僅腫瘤細胞，而且很多正常組織細胞都可用RPMI 1640進(jìn)行體外培養。大多數實(shí)驗室數年來(lái)將RPMI 1640作為實(shí)驗和細胞維持的基本培養液，用它培養了包括癌細胞和正常細胞在內的數十種細胞，無(wú)論是原代和長(cháng)期傳代等效果都很好。目前RPMI 1640是應用最為廣泛的培養基之一。

04Ham培養液

1962年Ham研究了適合小鼠二倍體細胞克隆化的培養基，將其命名為F7，在此基礎上進(jìn)行改良成為F10培養基，使之不僅適應小鼠細胞，而且也適用于人類(lèi)二倍體細胞的培養。Ham 1965年繼續研究制成了F12培養基，這種培養基的特點(diǎn)是在配方中加入了一些微量元素和無(wú)機離子，可以在加入很少血清的情況下應用，特別適合進(jìn)行單細胞培養和克隆化培養，是無(wú)血清培養中常用的基礎培養基。

公 司 簡(jiǎn) 介

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