細胞培養基的常見(jiàn)成分及功能
更新時(shí)間:2022-12-15瀏覽:742次
細胞培養基都需要相似的基本營(yíng)養物質(zhì),對維持生命和細胞生長(cháng)至關(guān)重要?;诩毎幕瘜W(xué)組成,水,各種來(lái)源的碳、氮和磷酸鹽,氨基酸,脂肪酸,維生素,微量元素,和鹽濃度都提供所需的濃度,以滿(mǎn)足細胞的生長(cháng),。根據營(yíng)養物質(zhì)的消耗速率,需要補充關(guān)鍵組分以保持細胞的高活力,并延長(cháng)培養時(shí)間。雖然已經(jīng)開(kāi)發(fā)出了適合多種細胞類(lèi)型的培養基,包括微生物,植物,昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物,不同的培養基在基本營(yíng)養成分方面可能大體相似,但本章節主要關(guān)注無(wú)血清、化學(xué)成分限定的CHO細胞培養基,主要是為了重組抗體的表達。
細胞培養基的常見(jiàn)成分及功能:
1.能量來(lái)源
每一個(gè)生長(cháng)培養基都需要碳源,以供細胞新陳代謝。碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖類(lèi),如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸,谷氨酰胺)。葡萄糖通常以終濃度為5.5mM的含量添加,大約等于人體血液中的葡萄糖水平。然而,你可以購買(mǎi)葡萄糖濃度變化范圍很廣的培養基來(lái)滿(mǎn)足你的具體需求。你甚至可以購買(mǎi)不含葡萄糖的培養基,然后自己定制濃度,模擬高糖的糖尿病狀況,或者研究低糖應激反應。
2.緩沖液
細胞需要一種特殊的pH值從7.2到7.4,否則它們無(wú)法發(fā)揮細胞功能,以供生長(cháng)和存活。在二氧化碳含量較高的培養器中,二氧化碳與水發(fā)生反應,產(chǎn)生氫離子,使培養基酸化。為了中和二氧化碳產(chǎn)生的酸度,并在培養基中保持pH值,大多數培養基都使用化學(xué)緩沖系統。然而,一些緩沖方法會(huì )干擾細胞生長(cháng)。
哺乳動(dòng)物細胞常見(jiàn)的緩沖系統是碳酸氫鈉,生物影響小。碳酸氫鈉與氫離子反應生成二氧化碳,隔離它們以保持pH值。然而,碳酸氫鈉的一個(gè)缺點(diǎn)是,它在生理pH值上不是緩沖效果。為了避免這個(gè)問(wèn)題,研究人員經(jīng)常使用替代品,如HEPES,增加某些培養基類(lèi)型的緩沖能力。