AtT-20（小鼠垂體瘤細胞）

一、細胞基本屬性
細胞名稱(chēng):AtT-20（小鼠垂體瘤細胞）
細胞別稱(chēng):AtT20; AtT 20; ATT-20
細胞貨號:SNL-239
細胞種屬:小鼠
生長(cháng)情況:聚團懸浮
培養條件:F12K+15%HS＋2.5%FBS+1%雙抗
培養環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期:2-3天
培養基體積:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細胞生長(cháng)速度及密度決定）
傳代方法:
1.輕輕吸走培養上清，留2-3ml培養基輕輕吹打細胞面吹下細胞；
2.混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5min，棄上清；
3.加新的*培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；
4.補足*培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
注意事項；半貼壁細胞會(huì )附著(zhù)瓶底，但貼壁不緊，輕輕吸取培養基輕輕吹打細胞面就會(huì )脫落，不需要胰m消化。建議使用培養皿培養，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格：200-300萬(wàn)/ml，1ml每管
凍存方法：
1.消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；
3.將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過(guò)夜，第二天轉入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過(guò)夜，第二天轉入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉入液氮后及時(shí)復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調整實(shí)驗方案
Tips：
細胞懸浮生長(cháng)，大部分聚集成葡萄串狀生長(cháng)，太大團塊應及時(shí)吹散避免中央細胞營(yíng)養不足死亡，小團塊無(wú)需處理。

我們推薦使用尚恩生物AtT-20（小鼠垂體瘤細胞）*培養基（產(chǎn)品貨號：SNLM-239）作為體外培養的培養基。