在培養貼壁細胞的時(shí)候,偶爾會(huì )出現細胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長(cháng)得非常密集,有的地方卻太稀疏。雖然這對于常規培養并不算大問(wèn)題,但有時(shí)則可能影響后續的實(shí)驗進(jìn)程。
所以一旦遇到貼壁不勻,建議排查原因并優(yōu)化操作方案。
本文中,小尚將細胞貼壁不均勻總結歸納為四種情況:
1. 局部生長(cháng)密集,密集處呈不規則分布
l 原因:一般是接種時(shí)沒(méi)有混勻,或者細胞傳代時(shí)沒(méi)有消化徹di從而形成細胞團塊導致的
l 解決方案:繼續培養1-2天,待細胞狀態(tài)穩定后,重新消化接種,接種時(shí)注意使用十字法或8字法混勻,接種后顯微鏡下確認細胞是否分散為單個(gè)細胞。
2. 培養器皿中央生長(cháng)密集,邊緣稀疏
l 原因:十字法或8字法混勻時(shí)搖晃次數過(guò)多,液體形成漩渦所導致
l 解決方案:繼續培養1-2天,待細胞狀態(tài)穩定后,重新消化接種。在混勻時(shí)搖晃5-6次即可。
3. 細胞在培養器皿的半邊生長(cháng),形成明顯分界線(xiàn)
l 原因: 這可能是培養箱架子不平造成的
l 解決方案:可通過(guò)調節培養箱架子以保持水平解決。
4. 細胞形成同心圓,并靠邊緣生長(cháng)
l 原因:這是由于培養箱風(fēng)扇故障或設備震動(dòng)導致
l 解決方案:在培養器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解,檢查培養箱風(fēng)扇是否正常運轉。
總之,細胞貼壁不均勻可能是多種因素造成的,對于前兩種情況,一般是傳代操作造成的,重新接種即可解決;而后兩種情況是硬件設施造成的,則需要調試設備。
同學(xué)們如果有遇到其他貼壁不均勻的情況,可以在下方評論區留言哦。
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